培养基( culture medium)是人工配制的,适合微生物生长、分离鉴别的营养基础。一般基础培养基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、琼脂等基本营养物质。微生物培养基应用范围很广。例如,无菌试验培养基可检查药品、生物制品是否污染细菌,它直接关系到人民用药安全;在临床及食品卫生检验中常用选择、鉴别培养基,此类培养基中根据用途不同,需要加入抑菌剂、指示剂、血液、糖等试剂,以利于特定细菌的分离与鉴别,需要使细菌大量生长、繁殖的各类培养基;病毒培养及疫苗生产中则需用组织细胞培养液,主要成分为多种氨基酸、核苷酸、无机盐、生长因子等。配置微生物培养基需要
配置微生物培养基步骤:
1、准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
2、校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
3、过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
4、分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
5、灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
配置微生物培养基注意事项:
1、根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。
2、注意各种营养物质的浓度及合适配比,保持合适渗透压。
3、将培养基的 pH 控制在适宜的范围之内,以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。
4、要注意各种原料的配比,每种培养基的配比合适的配比,可以按照老师的要求去做。
5、如需要加热的时候注意时间的把握。
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